BEAM(条形码激活抗原定位)是一种多路抗原筛选工作流程,能够快速发现抗原特异性b细胞(BEAM- ab)和t细胞(BEAM- t)克隆型。获得全面的抗原特异性细胞谱-包括全长配对V(D)J序列,基因表达和单细胞分辨率的细胞表面蛋白-鉴定罕见的抗原反应性T细胞和B细胞,以加速治疗发现。
10X Genomic官方效果展示图
可以。BEAM可无缝整合到chromium单细胞免疫分析流程中,让您能够结合单细胞分辨率的V(D)J测序、基因表达和细胞表面蛋白表达,筛选出特定抗原的BCR/TCR。因此,这项分析能够从抗原特异性的克隆型中获得全长配对的免疫受体序列。
您在BEAM流程中可对每个样本中多达15个抗原进行多重分析。用户提供的抗原需要在生物素化后与带有10x Genomics条形码的BEAM偶联物进行组装。随后可使用这些带有独特条形码的BEAM试剂组装物来标记B细胞和T细胞。
大多数的多聚体分析是基于荧光的,这意味着多聚体分子要连接荧光标记物,才能用于抗原特异性细胞的分选。这类研究可提供细胞群体中抗原特异性细胞的数量。有了BEAM,您不仅能获得这些信息,还能在单细胞水平上获得抗原特异性受体的全长配对V(D)J序列及全转录组基因表达数据。总之,这些数据带来了抗原特异性克隆型的完整细胞图谱,能够带您深入了解免疫应答。
由于抗原特异性的细胞群体很稀少,我们建议在制备10x Genomics文库之前分选出抗原阳性的细胞。不过,分选与否最终取决于您的实验目标。
BEAM提供了空的可加载的即用型MHC l类分子单体试剂盒,适用于以下的人类HLA和小鼠H2k等位基因:
Chromium Human MHC Class l A0201 Monomer Kit
Chromium Human MHC Class l A1101 Monomer Kit
Chromium Human MHC Class l A2402 Monomer Kit
Chromium Human MHC Class l BO702 Monomer Kit
Chromium Mouse MHC Class l H2Kb Monomer Kit
BEAM流程与多种样本类型兼容,包括PBMC、脾细胞、淋巴结穿刺液以及富集的B细胞或T细胞。
BEAM 技术能够以前所未有的单细胞分辨率快速发现抗原特异性B细胞(BEAM-Ab)和T细胞(BEAM-T),助力您获得新的生物学见解并推动免疫疗法开发。通过多重抗原筛选,您可以从同一样本中生成数十个至数百个高质量的候选物(hits),从而增加克隆型/受体的多样性和数量,用于治疗应用中的下游验证。